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ESF 921™昆蟲細胞培養基

產品簡介

ESF 921™昆蟲細胞培養基是一種完整的無血清、無蛋白的培養基,用于穩定的細胞生長、蛋白表達和桿狀病毒載體的生產,用于昆
蟲細胞,包括Sf9、Sf21、Tni和果蠅S2。僅供研究使用,不適用于診斷程序。

產品型號:96-001-01
更新時間:2023-12-06
廠商性質:代理商
訪問量:648

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產品描述 

ESF 921昆蟲細胞培養基是一種完整的無血清、無蛋白的培養基,用于穩定的細胞生長、蛋白表達和桿狀病毒載體的生產,用于昆 蟲細胞,包括Sf9、Sf21、Tni和果蠅S2。僅供研究使用,不適用于診斷程序。

產品信息

ESF921是一個1倍完整的不用稀釋、即用的培養基。無需添加谷AN酰胺或表面活性劑,如泊洛沙姆188;不推薦使用KANG生素,然而, 必要時,可以使用QING霉素-LIAN霉素(雙抗)或慶DA霉素(三抗)。

安全信息

 請閱讀安全數據表(SDS),并遵循操作說明;佩戴適當的防護眼鏡、衣服和手套。

培養

培養基: ESF 921

細胞系(s):Sf9、Sf21、Tni、S2 

培養類型:懸浮培養和貼壁培養 

推薦培養容器:搖瓶或轉瓶 

溫度范圍:27°C至28°C 

培養箱:干燥,無二氧化碳環境。確保適當的氣體交換,盡量減少培養物暴露在光線下。

細胞對于ESF 921培養基的使用馴化

細胞適應ESF 921培養基時,建議使用梯度適應。在開始適應過程之前,細胞存活率至少要達到95% (Sf9)、93% (Tni)、90%  (Sf21)或85% (S2),并且生長速度處于細胞分裂對數生長期。 

1.將細胞傳代至esf921與原始培養基的比例為50:50。在適應過程中,按照1 × 個細胞/ mL的原始播種密度接種。 

2.在干燥、無二氧化碳培養箱中以27°C培養,在軌道搖床平臺上以120-140 rpm旋轉搖瓶培養物。松開蓋子,允許氣體交換。

3.當活細胞數量為4-6 × 個/ mL時傳代(分裂后3-4天),按照75:25的比例放入ESF 921原始培養基中。

4.重復上一步,增加ESF 921與原始培養基的比例(75:25,然后是88:12,95:5),直到使用100% ESF 921??赡苄枰谝?種比例的情況下傳代多次。

5.昆蟲細胞在適應過程中可能會膨脹。膨脹2-3微米是正?,F象,5微米以上是細胞應激培養的提醒,應該用一批新的細胞重新開始 適應。 在100% ESF 921中傳代幾次后,活細胞計數應符合上表,存活率>90%。

低溫冷藏 

1.凍存培養基為無菌過濾的90% ESF 921+10%DMSO??商砑?.15 M的海藻糖,在4°C進行存儲和使用。 

2.準備所需數量的細胞,在對數生長期,活力>90%。

3.確定活細胞的密度,并計算所需的冷凍介質的體積,保證最終的細胞密度在25-50x106細胞/mL。

4.1000 rpm離心5分鐘,收獲細胞,將細胞重懸于預定體積的4°C冷凍培養基中。

5.按照1mL等分懸浮液放入冷凍瓶中。

6.按照標準程序(每分鐘降低1°C)在自動或手動控制速率的冷凍設備中實現低溫保存。

7.將冷凍細胞轉移到液氮中,建議在-200°C至-125°C的氣相儲存。


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